인간 상피 세포 재생 인자의 일반적인 특성과 생물학적 반응
상피 세포 재생 인자는 53 개의 아미노산으로 형성되는 단백질로, 인간과 포유 동물의 체내에 존재한다.
미국 코헨 박사는 1962 년 처음으로 상피 세포 재생 인자를 발견하고 1986 년 노벨 생리 의학상을 수상하고있다.
기본적인 특성은 53 개의 아미노산으로 이루어진 폴리펩티드이며, 분자량은 6,200 달톤이다.
70 년대 코헨 박사 팀은 인간 상피 세포 재생 인자와 마우스 상피 세포 재생 인자 (마우스 EGF)의 아미노산은 70 %가 일반적이라고 발표했다.
즉 mEGF의 70 %의 아미노산 서열이 hEGF와 같은 의미이다.
포유 동물의 체내에서 EGF를 꺼내려면 원료에 한계가 있고, 제품의 순도와 제품의 활성을 유지하는 것은 어렵다.
인간의 소변에 hEGF이 포함되어 있지만, 그 양은 미미한 데다 정상적인 생리 활성을 갖는 53,51 펩타이드 이외에 활성이 낮은 49,48 펩타이드, 그리고 더 활성이 낮은 펩타이드가 포함 된 경우이기 때문에 인간의 소변에서 추출한 EGF는 상품화에는 적합하지 않다.
또한 마우스의 턱밑 추출물도 원료에 한계가 있고, 공정도 복잡하고, 제품의 순도와 활성도 높지 않다는 단점이있다.
따라서 중국 과학원은 hEGF를 유전 공학 기술로 제조하는 연구에 착수하여 1993 년에 그 방법으로 hEGF를 만드는 데 성공했다.
그리고 중국 약품 생물 검정소 검사하여 아미노산 서열과 물리 화학적 특성, 생물학적 반응 등 인체에 hEGF와 동일한 것으로 판정되었다.
1994 년 말 중국 위생부 약품심사센터Ⅰ류 신약인체임상연구 신청의 심사를 거쳐 중국의 고순도 활성 hEGF의 대규모 제조와 응용의 기초가되었다.
hEGF는 다기능 세포 재생 인자 세포막의 hEGF 수용체와 결합하여 새로운 세포의 생산을 촉진한다.
hEGF 수용체는 일종의 당 단백질로 인체의 세포막 표면에 존재한다.
즉, 상처받은 피부를 복구하거나 자외선 등의 유해 물질로부터 피부를 지키는 등, 피부의 유지에 중요한 역할을한다.
EGF와 세포막의 EGF 수용체의 결합은 포화도와 고도의 민감성을 갖추고있다.
즉, hEGF는 미량 세포에 작용, 게다가 일단 EGF와 수용체가 결합하면 다른 EGF 분자 및 세포에서 EGF 수용체의 결합을 억제한다.
동일한 세포는 두 개 이상의 EGF 분자와 동시에 결합 할 수 없으며 다른 EGF 분자는 세포에 불필요한 것이되고 만다.
hEGF는 광범위한 생물학적 반응을 갖추고있어 체내 외의 상피와 상피 조직의 성장을 촉진하는 작용이있다.
hEGF 궤양을 예방하고 각막의 상처 회복과 피부 손상의 복구 등을 촉진한다. 이 특성을 이용하여 미국과 쿠바는 피부 손상에 유전자 재조합에 의해 만든 EGF 연고를 사용하고있다.
또한 hEGF는 피부의 상피 세포의 신진 대사를 촉진, 소염, 진정 작용이 있으므로 피부 노화 방지 및 회춘 등의 목적으로 화장품 용도로 더욱 사용이 기대된다.
EGF의 생물학적 활성도 측정
EGF의 생물학적 활성 측정은 체외에서 세포를 배양하여 실시한다.
인간 배아 상피 세포를 체외에서 배양하여 EGF를 가하고있는 일정한 시간 배양한다. 또한 H-Tdr을 이외에도 몇 시간 배양하여 배양액을 제외하고 세포를 고정한다. 또한 세포를 탄산 소다 용액으로 용해한다. 일정량을 꺼내 여과지 위에서 동위 소를 측정하면 그 성장 속도는 2 ~ 2.5 배가되는 것을 알 수있다. 또한 MTT 염색법으로도 측정 할 수있다.
화장품 중 EGF의 활성도를 확인하려면 먼저 거기에서 EGF를 추출하여 상기의 방법으로 측정한다.
EGF의 안정성 연구
EGF는 일종의 활성 폴리펩티드이다. EGF는 산성과 알칼리성 열에 대하여 안정 인 것으로보고되고있다.
의료용 연고 나 화장품에 일반적으로 함유되어있는 성분이 EGF의 활성에 영향을 미치지 않는다. 일반적으로 배합되는 원료로는 보습제, 방부제, 자외선 흡수제, 계면 활성제 등이다.
-20 ℃의 무균 상태에서 hEGF 영구적으로 저장할 수있다.
유전 공학 기술로 만들어진 EGF와 친수성 기질은 서로 용해 성질이있어 세포 생리 활성의 저하없이 최소한 2 년간 보관 가능하다.
hEGF의 독성 연구
현재 국제적으로 의약과 일용 화학 업계에서 사용되는 EGF는 유전자 공학으로 만들어진 hEGF이다.
중국 국가 의업 관리국 약물 안전성 평가 연구 센터와 상해 의약 공업 연구원毒理연구소가 그 안전성을 입증했다.
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